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穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選實(shí)驗(yàn)
更新時(shí)間:2024-07-26
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廠(chǎng)商性質(zhì):其他
穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選實(shí)驗(yàn)
穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選實(shí)驗(yàn)目的:
穩(wěn)轉(zhuǎn)株長(zhǎng)用于基因研究方向,便于長(zhǎng)期觀(guān)察和檢驗(yàn)基因?qū)τ诩?xì)胞功能以及蛋白的相互作用。
一般轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)方法:
用轉(zhuǎn)染質(zhì)?;虿《厩秩镜姆椒▽?gòu)建好的含靶基因的載體導(dǎo)入細(xì)胞,根據(jù)不同的基因載體中所含的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的試劑進(jìn)行篩選混合陽(yáng)性克隆。在陽(yáng)性混合克隆的基礎(chǔ)上,得到單細(xì)胞長(zhǎng)出的陽(yáng)性單克隆,繼而得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。
一般篩選方法:
1、轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后,單克隆方法篩選穩(wěn)定細(xì)胞系
對(duì)大多數(shù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率較低。對(duì)于基因過(guò)表達(dá),如果轉(zhuǎn)染效率達(dá)到40%,基因過(guò)表達(dá)尚可。但是對(duì)于基因干擾實(shí)驗(yàn),對(duì)轉(zhuǎn)染效率要求遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于基因過(guò)表達(dá),通常質(zhì)粒轉(zhuǎn)染無(wú)法滿(mǎn)足。
另外,質(zhì)粒游離于細(xì)胞質(zhì)中,很快降解,無(wú)法滿(mǎn)足較長(zhǎng)時(shí)間的檢測(cè)項(xiàng)目;質(zhì)粒轉(zhuǎn)染整合幾率極低,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建耗時(shí)耗力,且得率很低,往往需要挑取單克隆株。
2、病毒感染篩選穩(wěn)定細(xì)胞株
病毒感染方法較質(zhì)粒轉(zhuǎn)染篩選單克隆方法更方便和高效,是目前主流的穩(wěn)定細(xì)胞系篩選方法。用慢病毒制備穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,由于其高效整合、高效轉(zhuǎn)錄、高效表達(dá)、宿主范圍廣,感染效率高,且與細(xì)胞染色體整合而不發(fā)生基因重排,是制備穩(wěn)定細(xì)胞株的理想載體。
服務(wù)內(nèi)容:1、穩(wěn)定:15代以?xún)?nèi)細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)。
2、迅速:一般控制在1個(gè)月以?xún)?nèi)完成構(gòu)建。
3、經(jīng)濟(jì):價(jià)格實(shí)惠。
4、質(zhì)量:對(duì)外源基因進(jìn)行嚴(yán)格鑒定。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫(kù)、樣本保存庫(kù)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米,可滿(mǎn)足同時(shí)飼養(yǎng)清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物。核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)團(tuán)隊(duì)主要來(lái)自大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠?yàn)榭蛻?hù)提供研究方案策劃、項(xiàng)目實(shí)施及項(xiàng)目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項(xiàng)目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。