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掃描電鏡檢測

掃描電鏡檢測

簡要描述:
掃描電鏡檢測是1965年發(fā)明的較現(xiàn)代的細(xì)胞生物學(xué)研究工具,它具有制樣簡單、放大倍數(shù)可調(diào)范圍寬、圖像的分辨率高、景深大等特點(diǎn)。近年來,掃描電鏡已廣泛地應(yīng)用在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、等學(xué)科的領(lǐng)域中。

更新時(shí)間:2023-10-30

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廠商性質(zhì):其他

一、掃描電鏡檢測實(shí)驗(yàn)原理

   主要是通過發(fā)射電子聚焦光束來掃描樣品的表面形態(tài).電子束與樣品表面的樣子發(fā)生作用,產(chǎn)生多種能夠被檢測的信號(hào),這些信號(hào)就包含了樣品的表面形態(tài)和組成.染色。

二、掃描電鏡檢測實(shí)驗(yàn)流程

1. 樣品的初步處理

a.取材樣品面積可達(dá)8mm×8mm,厚度可達(dá)5mm。對(duì)于易卷曲的樣品如血管、胃腸道粘膜等,可固定在濾紙或卡片紙上,以充分暴露待觀察的組織表面。

b.樣品的清洗

(1)用等滲的生理鹽水或緩沖液清洗;

(2)用5%的蘇打水清洗;

(3)用超聲震蕩或酶消化的方法進(jìn)行處理。

c. 固定

固定所用的試劑和透射電鏡樣品制備相同,常用戊二醛及鋨酸雙固定。由于樣品體積較大,固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。也可用快速冷凍固定。

d. 脫水

樣品經(jīng)漂洗后用逐級(jí)增高濃度的酒精或丙酮脫水,然后進(jìn)入中間液,一般用醋酸異戊酯作中間液。

2. 樣品的干燥

a.空氣干燥法

空氣干燥法又稱自然干燥法,就是將經(jīng)過脫水的樣品,讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。這種方法的大優(yōu)點(diǎn)是簡便易行和節(jié)省時(shí)間;它的主要缺點(diǎn)是在干燥過程中,組織會(huì)由于脫水劑揮發(fā)時(shí)表面張力的作用而產(chǎn)生收縮變形。因此,該方法一般只適用于表面較為堅(jiān)硬的樣品。

b. 冷凍干燥法

(1)置于冷凍保護(hù)劑中:將樣品置于冷凍保護(hù)劑中浸泡數(shù)小時(shí)。常用的冷凍保護(hù)劑為10%~20%二甲基亞砜水溶液,或15%~40%甘油水溶液。

(2)驟冷:將經(jīng)過保護(hù)劑處理的樣品迅速投入用液氮預(yù)冷至(150℃的氟利昂冷凍劑中,使樣品中的水分很快凍結(jié)。

(3)干燥:將已凍結(jié)的樣品移到冷凍干燥器內(nèi)已預(yù)冷的樣品臺(tái)上,抽真空,經(jīng)幾小時(shí)或數(shù)天后,樣品即達(dá)到干燥。本方法不需要脫水,避免了有機(jī)溶劑對(duì)樣品成分的抽提作用,不會(huì)使樣品收縮,也是較早使用的方法。但是,由于花費(fèi)時(shí)間長,消耗液氮多,容易產(chǎn)生冰晶損傷,因此未被廣泛應(yīng)用。

3. 樣品的導(dǎo)電處理(真空鍍膜法)

       真空鍍膜法是利用真空膜儀進(jìn)行的。其原理是在高真空狀態(tài)下把所要噴鍍的金屬加熱,當(dāng)加熱到熔點(diǎn)以上時(shí),會(huì)蒸發(fā)成極細(xì)小的顆粒噴射到樣品上,在樣品表面形成一層金屬膜,使樣品導(dǎo)電。噴鍍用的金屬材料應(yīng)選擇熔點(diǎn)低、化學(xué)性能穩(wěn)定、在高溫下和鎢不起作用以及有高的二次電子產(chǎn)生率、膜本身沒有結(jié)構(gòu)?,F(xiàn)在一般選用金或金和碳。為了獲得細(xì)的顆粒,有用鉑或用金-鈀、鉑-鈀合金的。金屬膜的厚度一般為10 nm~20 nm。真空鍍膜法所形成的膜,金屬顆粒較粗,膜不夠均勻,操作較復(fù)雜并且費(fèi)時(shí),目前已經(jīng)較少使用。4. 拍攝

三、客戶提供

組織、細(xì)胞

四、公司提供

基本實(shí)驗(yàn)步驟、藥品、樣品處理、圖片及圖片分析

實(shí)驗(yàn)周期:3-4周

伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫、樣本保存庫等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米,可滿足同時(shí)飼養(yǎng)清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物。核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)團(tuán)隊(duì)主要來自中國科學(xué)院大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠?yàn)榭蛻籼峁┭芯糠桨覆邉?、?xiàng)目實(shí)施及項(xiàng)目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項(xiàng)目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。

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