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    小鼠腹腔巨噬細胞的分離方法

    發(fā)布時間: 2024-08-02  點擊次數(shù): 942次
      1. C57BL/6小鼠脫頸處死。
     
      2. 腹部剃毛,75%酒精消毒。
     
      3. 用注射器吸取10mL冷的生理鹽水,提起小鼠腹中部的皮膚和腹膜,讓針頭從提取處穿刺進入小鼠腹腔,緩緩?fù)谱⑸睇}水。
     
      4. 輕揉小鼠腹部數(shù)次,靜置3min,使液體在腹腔內(nèi)充分流動。
     
      5. 用鑷子提起下腹皮膚,使與腹膜分開,在鑷子提取處將皮膚剪開一個小口,再撕開整個腹部皮膚,使腹膜暴露。
     
      6. 將注射器針頭插入縫隙處抽取腹腔液。
     
      7. 將腹腔液在250g下離心5分鐘。
     
      8. 將細胞重懸在含有10%FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中,并在37°C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育2小時。
     
      9. 然后去除非貼壁細胞,用PBS洗滌,分離后立即將腹腔巨噬細胞用于后續(xù)實驗。
     
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